%0 Journal Article %T Livin靶向RNA干扰对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响 %A 李凡 %A 王小毅 %A 陈力 %A 田甜 %A 李佳 %A 任国胜 %J 第三军医大学学报 %P 2302-2306 %D 2008 %X 目的研究凋亡抑制蛋白Livin靶向RNA干扰MDA-MB-231对细胞增殖和凋亡的影响,探讨其可能的机制。方法构建3个靶向Livin的siRNA真核表达载体,分别转染乳腺癌细胞MDA-MB-231后,通过RT-PCR、Westernblot技术检测干扰前后MDA-MB-231细胞Livin、Caspase-3和Smac/DIABLO在mRNA、蛋白水平的表达;采用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞法测细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡以及观察细胞形态变化。结果成功构建了针对Livin基因的3个特异性siRNA表达载体。它们不同程度地抑制了MDA-MB-231细胞Livin基因的表达,以si-Livin2抑制效率最高,它对Livin的mRNA和蛋白的抑制率分别达76.4%,70.2%。si-Livin2转染48h后,与未转染组相比,细胞增殖活力受到抑制,转染48h抑制率达36.1%。细胞周期重新分布,G0/G1期上升为(71.75±1.31)%,S期下降为(18.06±1.46)%;细胞凋亡率上升为(13.28±1.65)%;电镜下可见典型的凋亡细胞特征。细胞内Caspase-3,Smac/DIABLO的mRNA、蛋白表达有所上升。结论Livin靶向RNA干扰通过上调Caspase-3,Smac/DIABLO表达有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进凋亡。 %K 乳腺癌 %K Livin %K RNA干扰 %K 增殖 %K 凋亡 %K MDA-MB-细胞株 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=080456