%0 Journal Article %T 模拟微重力条件下小鼠拟胚体形成及分化的初步观察 %A 刘卫生 %A 王英杰 %A 刘涛 %A 张世昌 %J 第三军医大学学报 %P 1594-1597 %D 2008 %X 目的研究模拟微重力条件下小鼠胚胎干细胞(embryonicstemcell,ESc)拟胚体(embryoidbodies,EBs)的形成及分化。方法胰酶消化普通培养的小鼠胚胎干细胞,调整细胞数为1×106?ml-1,移入可模拟微重力的旋转型生物反应器内进行培养,显微镜动态观察鼠EBs的形成,苏木精-伊红染色观察ESc的组织细胞分化情况,检测培养过程中乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)的漏出量。取不同时相的EBs,接种6孔培养板培养3~5d,倒置相差显微镜观察EBs来源细胞的分化。结果生物反应器旋转培养24h即可肉眼观察到大量多细胞聚集体形成,相差显微镜和立体显微镜下发现,72h后细胞聚集体进一步形成均一的EBs。随培养时间延长EBs体积不断增大,并不断有新的EBs出现。HE染色显示,EBs中的ESc呈现多组织多细胞分化特征,培养后期(12d以后)较大EBs中心有不同程度的坏死,伴LDH漏出量的明显升高。接种EBs于6孔培养板后,镜下观察到不同类型的细胞,如内皮样细胞、成纤维样细胞、肝细胞样细胞、血管样结构以及可自发性搏动的心肌样细胞。结论ESc在模拟微重力条件下可大量快速形成EBs,伴有不同类型的组织细胞分化。旋转型生物反应器可作为ESc研究的有用工具。 %K 胚胎干细胞 %K 拟胚体 %K 分化 %K 生物反应器 %K 微重力 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=071238