%0 Journal Article
%T 腺病毒载体介导的siRNA对3T3-L1细胞脂联素表达的影响
%A 孟凡萍
%A 杨刚毅
%A 李钶
%A 李伶
%A 齐晓亚
%A 刘建雷
%A 李荣
%J 第三军医大学学报
%P 1312-1315
%D 2008
%X 目的构建携带小鼠脂联素（Acrp30）siRNA腺病毒载体，并检测其对小鼠脂肪细胞Acrp30表达的影响。方法首先用KpnⅠ+NotⅠ双酶切本课题组前期构建的质粒pSilencer1.0-U6-Acrp30-1和pSilencer1.0-U6-Acrp30-3，得到目的片段U6-Acrp30-1和U6-Acrp30-3，并将目的片段亚克隆入穿梭质粒pShuttle，用PmeⅠ线性化穿梭质粒pShuttle-U6-Acrp30-1和pShuttle-U6-Acrp30-3，并与pAdeasy-1在BJ5183内同源重组，筛选、鉴定、测序后，在XL10-Gold中扩增重组腺病毒质粒，最后在293细胞内包装扩增为重组腺病毒Ad-Acrp30-1和Ad-Acrp30-3。用此重组腺病毒感染3T3-L1脂肪细胞，用RT-PCR和ELISA检测其Acrp30mRNA和蛋白表达。结果设计并构建了小鼠Acrp30基因特异性siRNA腺病毒载体，该载体感染脂肪细胞后，能显著抑制其Acrp30mRNA和蛋白表达。结论构建的Acrp30基因特异性siRNA腺病毒载体能有效的抑制脂联素基因在3T3-L1脂肪细胞中的表达。
%K RNA干扰
%K 腺病毒载体
%K 脂联素
%K T-L细胞
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=070933