%0 Journal Article
%T Skp2shRNA表达质粒的构建及其对肺癌细胞生长的影响
%A 李胜
%A 梅同华
%A 黎联
%A 张明川
%J 第三军医大学学报
%P 1275-1278
%D 2008
%X 目的构建Skp2基因的RNAi真核表达质粒，观察其对SPC-A-1肺癌细胞内Skp2基因表达及细胞生长的影响。方法根据GenBank中Skp2cDNA序列设计针对Skp2基因的shRNA序列，合成序列并克隆入pGenSil-1质粒中，构建Skp2pshRNA重组质粒。脂质体介导重组质粒转染SPC-A-1肺癌细胞。RT-PCR检测肺癌细胞Skp2mRNA的表达，Westernblot检测Skp2蛋白表达。MTT检测各组细胞生长情况，流式细胞仪检测细胞周期改变。结果重组质粒经酶切鉴定和测序，证实表达干扰质粒构建成功。转染重组质粒的肺癌细胞Skp2mRNA和蛋白的表达明显下降(P<0.05)，细胞生长增殖受到抑制，阻滞在G0／G1期的细胞比例增加，而进入S期的细胞比例明显下降(P<0.05)。结论构建的Skp2shRNA表达质粒能有效下调Skp2基因的mRNA及蛋白的表达、抑制细胞的生长增殖。
%K Skp基因
%K RNA干扰
%K 短发夹RNA
%K 肺癌细胞
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=070723