%0 Journal Article
%T 一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白多克隆抗体制备
%A 张竹君
%A 周玉
%A 李鹏
%A 易维京
%A 杨明珍
%A 李淑慧
%A 胡川闽
%J 第三军医大学学报
%P 1242-1245
%D 2008
%X 目的获得一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白（IRF-4？bindingprotein,IBP）的高效价特异性多克隆抗体。方法通过生物信息学分析选择IBP特异片段（1228～1893bp），目的片段cDNA插入pET32a和pGEX-KG原核表达载体,分别转化BL21感受态细菌,IPTG诱导表达后组合应用阴离子交换层析、His、GST亲和层析技术获得免疫原（pET32a/IBP融合蛋白）及检测原（pGEX-KG/IBP融合蛋白）。HPLC鉴定纯度。利用改良快速免疫法获得兔抗IBP多克隆抗血清,并经蛋白A柱纯化,非特异性抗体吸收。间接ELISA检测抗体滴度、Westernblot和免疫组化实验检测抗体特异性。结果表达并纯化的pET32a/IBP融合蛋白纯度达92%,pGEX-KG/IBP融合蛋白纯度达87%。IBP多克隆抗体滴度达1∶51200，能特异地和内源性IBP结合。结论成功表达并纯化了IBP融合蛋白,制备了高滴度、高特异性的抗IBP多克隆抗体。
%K IRF-结合蛋白
%K 原核表达
%K 蛋白纯化
%K 快速免疫法
%K 多克隆抗体
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=071333