%0 Journal Article
%T RNAi重组体抑制白血病K562细胞系中NPM1基因的表达
%A 何鹏
%A 骆展鹏
%A 张伶
%A 杨松
%A 钟晓明
%A 高玉洁
%J 第三军医大学学报
%P 938-941
%D 2008
%X 目的构建核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin1，NPM1)特异性的RNAi真核表达载体，观察对白血病K562细胞系NPM1表达的抑制作用。方法采用RT-PCR检测白血病细胞系(THP1和K562)和急性髓系白血病（AML）细胞NPM1mRNA水平。设计合成2条针对NPM1基因并具有小发夹结构的DNA序列，经退火形成互补双链，再克隆至载体pGenSil-1中构建含NPM1的RNAi重组体，经酶切及测序鉴定后通过脂质体转染K562细胞，同时设立pGenSil-1转染组和pGenSil-1/neg转染组。采用RT-PCR检测各组转染细胞中NPM1的mRNA水平。结果白血病细胞系和AML细胞均高表达NPM1mRNA。针对人NPM1基因的RNAi重组体构建成功，并能够稳定转染K562细胞，导致白血病细胞NPM1mRNA相对表达量下降64％，而pGenSil-1转染组和pGenSil-1/neg转染组未能下调NPM1表达。结论白血病细胞高表达NPM1基因，其mRNA表达水平能够被靶向NPM1的RNAi重组体特异性地下调。
%K 核仁磷酸蛋白
%K RNA干扰
%K 白血病
%K K细胞
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=071448