%0 Journal Article
%T 分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70的构建及鉴定
%A 吕琳
%A 曹红丹
%A 王丕龙
%A 刘少宁
%A 王丽娟
%A 向廷秀
%J 第三军医大学学报
%P 890-893
%D 2008
%X 目的用结核分枝杆菌热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)启动子改建分枝杆菌穿梭质粒pJEM11为分枝杆菌穿梭表达质粒pJHSP70，并对其功能进行鉴定。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板，利用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)扩增HSP70启动子，克隆至pMD18-T载体，经鉴定后，再定向克隆入pJEM11的ApaⅠ位点与SnaBⅠ位点之间,构建pJHSP70载体,并对载体进行PCR及酶切鉴定，然后再将幽门螺杆菌（Helicobacterpylori,HP）尿素酶B亚单位(ureaseBsubunit,UreB)基因克隆入pJHSP70载体,评价其在耻垢分枝杆菌（Mycobacteriasmegmatis，M.smegmatis）mc2155中的表达情况。结果从BCG基因组中扩增出160bp的基因片段，所构建的穿梭质粒经酶切和PCR鉴定与预期结果一致。测序结果证实插入片段正确，UreB基因在M.smegmatis中成功表达。结论成功改建穿梭质粒pJEM11为穿梭表达质粒pJHSP70。
%K 结核分枝杆菌
%K 热休克蛋白
%K 启动子
%K 基因表达
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=071325