%0 Journal Article %T 小鼠支气管肺泡干细胞的培养鉴定和分选 %A 钱莘 %A 安江洪 %A 敖绪军 %A 孙建国 %A 陈正堂 %J 第三军医大学学报 %P 775-778 %D 2008 %X 目的对正常成年小鼠肺内支气管肺泡干细胞(bronchoalveolarstemcell,BASC)进行克隆培养、鉴定和流式细胞仪分选。方法用胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织制备肺单细胞悬液,并经免疫磁珠分选Sca-1+细胞;胶原蛋白和小鼠Swiss-3T3成纤维细胞系包被培养板;无血清乳腺上皮细胞培养基培养Sca-1+细胞;双重免疫荧光染色Clara细胞抗原(CCA)和肺泡表面活性蛋白C(SP-C)鉴定BASC,并用流式细胞仪分选BASC。结果通过胶原酶和分散酶联合消化小鼠肺组织,平均每只成年小鼠可得到有核细胞总数(1.6~1.8)×107;经磁珠分选后的Sca-1+细胞纯度明显高于未经分选的肺Sca-1+细胞[分别为(87.3±5.9)%、(9.6±1.8)%,P<0.05];在无血清乳腺上皮细胞培养基中Sca-1+细胞在第4天可形成BASC克隆和其他不表达CCA、SP-C的细胞克隆;流式细胞仪检测CD45-CD31-Sca-1+CD34+细胞占肺细胞总数的0.7%~1.1%,根据此分子标记能够分选出高纯度的BASC。结论通过胶原酶和分散酶联合消化,免疫磁珠分选的Sca-1+细胞在无血清乳腺上皮细胞培养基中能够形成非纯化的BASC克隆,而流式细胞仪可以分选出高纯度的BASC。 %K 干细胞 %K Clara细胞抗原 %K 肺泡表面活性蛋白C %K 流式细胞术 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=080109