%0 Journal Article %T 乳腺癌细胞中PNRC基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究 %A 张艳 %A 陈彬 %A 李渝萍 %A 陈健 %A 陈敏 %A 娄桂予 %A 周度金 %J 第三军医大学学报 %P 299-302 %D 2008 %X 目的研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-richnuclearreceptorcoactivatorprotein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用。方法应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况,并运用“MethPrimer”软件对PNRC启动子区进行分析,预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)检测PNRC启动子区CpG岛的甲基化状况;PT-PCR及Northern杂交检测乳腺癌细胞经甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用后,PNRC基因mRNA的表达情况;Westernblot检测5-Aza-dc干预对PNRC蛋白表达的影响;将含PNRC启动子序列的报告质粒转染乳腺癌细胞,再经5-Aza-dc处理后,检测PNRC基因启动子的活性。结果PNRC基因在乳腺癌细胞中的表达较正常乳腺细胞明显降低;乳腺癌细胞PNRC基因启动子区存在CpG岛甲基化;乳腺癌细胞经5-Aza-dc处理后,PNRC基因mRNA及蛋白表达水平显著增加,其PNRC基因启动子的活性也明显增强。结论PNRC基因启动子区的高甲基化导致PNRC在乳腺癌细胞中表达降低。 %K PNRC %K DNA甲基化 %K MSP %K -氮杂-’-脱氧胞苷 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=070744