%0 Journal Article
%T 人BMP-7基因重组腺病毒的构建与鉴定
%A 方针强
%A 叶钢
%A 欧阳一辛
%A 刘永亮
%A 贾维胜
%A 冯嘉瑜
%J 第三军医大学学报
%P 153-156
%D 2008
%X 目的构建含有人骨形态发生蛋白-7（bonemorphogeneticprotein-7，BMP-7）基因的重组腺病毒载体，并对其相关指标进行鉴定，观察其对肾小管上皮细胞株（HKC）细胞的转染情况。方法用基因工程技术将人BMP-7基因cDNA亚克隆至穿梭质粒pDC316上，利用脂质体介导的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-BMP-7转染入HEK293细胞，进行同源重组，得到腺病毒重组质粒Ad5-BMP-7，并在其中包装扩增病毒。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中所带绿色荧光蛋白GFP报告基因，进行病毒滴度的测定和对HKC细胞感染效率的检测。结果酶切鉴定及PCR结果证明BMP-7基因重组腺病毒载体构建成功，病毒滴度达1.25×1010PFU/ml，对HKC有较强感染能力。结论应用细胞内同源重组方法成功构建了含人BMP-7基因的重组腺病毒载体。
%K 腺病毒
%K 骨形成蛋白-
%K 同源重组
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=071133