%0 Journal Article %T 人脐血内皮祖细胞体外扩增、鉴定和生物学活性 %A 王博 %A 王舒楠 %A 张伟国 %A 陈金华 %A 李雪 %J 第三军医大学学报 %P 1744-1748 %D 2009 %X 目的建立一种稳定的体外分离培养和鉴定人脐血内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)的方法,并探讨利于EPCs增殖的最佳接种浓度。方法采用密度梯度离心法分离得到单个核细胞,制成1×106/ml、1.5×106/ml、2×106/ml、2.5×106/ml、3×106/ml、3.5×106/ml、4×106/ml7个密度接种于铺被人纤维连接蛋白的培养瓶,比较各接种密度的贴壁细胞数和细胞集落形成情况,并采用激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和免疫荧光鉴定EPCs。结果不同接种密度得到的贴壁细胞数和细胞集落数有差别,在2.5×106/ml密度接种时得到的最佳贴壁细胞数和细胞集落数,与其他密度比较差异有统计学意义(P<0.05);双染色阳性细胞为正在分化EPCs;流式细胞仪检测内皮祖细胞对CD34、AC133、VEGFR2的阳性表达率分别为(1.67±0.35)%、(12.63±9.70)%、(66.81±6.63)%;免疫荧光检测内皮祖细胞一致性表达CD34、AC133、VEGFR2;黏附能力和迁移能力检测结果分别为(33.7±1.6)、(29.2±1.2)。结论采用Ficoll密度梯度离心法结合贴壁筛选法可以较好地分离人脐血EPCs,以2.5×106/ml的密度接种培养可获得良好的细胞分化和增殖。 %K 人脐血 %K 内皮祖细胞 %K 单个核细胞 %K 接种密度 %K 细胞培养 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200906140