%0 Journal Article
%T FAK靶向RNAi重组体的构建及其抗多细胞球体形成效应
%A 陈玉英
%A 向浏欣
%A 杨黎
%A 潘凤
%A 蒋金妍
%A 陈克力
%A 梁后杰
%J 第三军医大学学报
%P 1633-1636
%D 2009
%X 目的构建RNA干扰（RNAi）重组体抑制黏着斑激酶（FAK）表达，并探讨其对结肠癌多细胞球体（MCSs）形成的影响。方法针对FAKcDNA序列设计并合成1对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其对照序列，经退火后插入pGenesil-1中构建重组体。经双酶切鉴定和DNA测序后，用脂质体2000将其转染结肠癌HT29细胞，并用G418稳定筛选，采用Real-timePCR和Westernblot检测干扰前后FAK在HT29内的表达变化，并作细胞悬浮培养观测靶向干扰FAK对MCSs形成的影响。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确；靶向干扰FAK后,其mRNA和蛋白表达分别显著下调（79.20±2.97）%和（78.47±4.39）%，且细胞不易聚集形成MCSs。结论成功构建FAK靶向RNAi重组载体，显著地抑制FAK表达，并能有效地抑制MCSs的形成。
%K 黏着斑激酶
%K RNA干扰
%K 构建
%K 多细胞球
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200812006