%0 Journal Article
%T PLCεshRNA质粒构建及功能鉴定
%A 郭永灿
%A 罗春丽
%A 颜令
%A 欧俐苹
%A 赵懿
%A 蔡晓钟
%J 第三军医大学学报
%P 1657-1660
%D 2009
%X 目的构建PLCε基因的shRNA表达载体及其功能鉴定。方法设计并合成针对PLCε基因mRNA的寡核苷酸序列，插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中构建重组载体pGenesil-PLCε。重组载体经酶切、测序鉴定后转染膀胱癌细胞，RT-PCR及Westernblot检测对膀胱癌细胞株PLCε的抑制作用，流式细胞术(FCM)及MTT检测其对膀胱癌细胞株增殖活力影响。结果成功构建了针对2个PLCε基因的shRNA表达载体。RT-PCR、Westernblot检测结果显示：2个重组质粒载体转染T24细胞株后对PLCεmRNA及对PLCε蛋白表达均有明显抑制，流式细胞术结果表明细胞阻滞于G0/G1期，MTT检测表明重组的载体质粒明显抑制T24细胞增殖活力。结论针对PLCε基因的shRNA能有效抑制膀胱癌T24细胞中PLCε基因的表达及膀胱癌细胞增殖。
%K 载体构建
%K 膀胱癌
%K shRNA
%K PLCε
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200812212