%0 Journal Article %T PLCεshRNA质粒构建及功能鉴定 %A 郭永灿 %A 罗春丽 %A 颜令 %A 欧俐苹 %A 赵懿 %A 蔡晓钟 %J 第三军医大学学报 %P 1657-1660 %D 2009 %X 目的构建PLCε基因的shRNA表达载体及其功能鉴定。方法设计并合成针对PLCε基因mRNA的寡核苷酸序列,插入绿色荧光蛋白质粒真核表达载体pGenesil中构建重组载体pGenesil-PLCε。重组载体经酶切、测序鉴定后转染膀胱癌细胞,RT-PCR及Westernblot检测对膀胱癌细胞株PLCε的抑制作用,流式细胞术(FCM)及MTT检测其对膀胱癌细胞株增殖活力影响。结果成功构建了针对2个PLCε基因的shRNA表达载体。RT-PCR、Westernblot检测结果显示:2个重组质粒载体转染T24细胞株后对PLCεmRNA及对PLCε蛋白表达均有明显抑制,流式细胞术结果表明细胞阻滞于G0/G1期,MTT检测表明重组的载体质粒明显抑制T24细胞增殖活力。结论针对PLCε基因的shRNA能有效抑制膀胱癌T24细胞中PLCε基因的表达及膀胱癌细胞增殖。 %K 载体构建 %K 膀胱癌 %K shRNA %K PLCε %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200812212