%0 Journal Article
%T 应用AdEasy腺病毒改良载体系统构建携带β-半乳糖苷酶基因重组腺病毒的实验研究
%A 洪思琦
%A 王佚
%A 毕杨
%A 郭振华
%J 第三军医大学学报
%P 1649-1652
%D 2009
%X 目的应用AdEasy腺病毒改良载体系统构建携带β-半乳糖苷酶(β-galactosidase，β-gal)基因重组腺病毒。方法将β-gal基因克隆到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上，在BJ5183大肠杆菌内与pAdEasy1骨架质粒完成同源重组；经脂质体介导转入HEK293细胞包装、扩增并经反复乒乓感染获得携带β-gal基因的重组腺病毒Ad-β-gal；有限稀释法检测病毒滴度；X-gal组织化学染色检测重组腺病毒Ad-β-gal在HEK293细胞中的功能。结果成功构建携带β-gal基因的重组腺病毒Ad-β-gal，病毒滴度达（2.5~4.0）×1011EFU/ml；感染复数（multiplicityofinfection，MOI）为10时对HEK293细胞48h转染率达70%，并在X-gal试剂作用下，细胞呈现蓝色。结论成功构建了携带β-gal基因的重组腺病毒，能高效感染293细胞，并功能性表达β-半乳糖苷酶。
%K 腺病毒
%K β-半乳糖苷酶
%K 基因治疗
%K 转染
%K 乳糖不耐受症
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200812160