%0 Journal Article
%T CASK下调表达对人血管内皮细胞ECV-304增殖能力的影响
%A 陈建
%A 苏踊跃
%A 梁光萍
%A 陈渝
%A 罗向东
%A 杨宗城
%J 第三军医大学学报
%P 1144-1146
%D 2009
%X 目的建立CASK下调表达细胞株，研究钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶（calcium,calmodulin-associatedserine/threoninekinase,CASK）下调表达对ECV-304细胞增殖能力的影响。方法将包含针对CASK基因干扰siRNA片段的pGenesil-1-hCASK重组质粒转染人ECV-304细胞株，经G418加压筛选，成功筛选出CASK下调表达的细胞株。用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中CASK基因的表达水平。采用流式细胞技术、MTT法观察CASK下调表达对ECV-304细胞增殖能力的变化。结果成功筛选出CASK下调表达ECV-304细胞株（siCASK细胞株），这些细胞在传代过程中绿色荧光蛋白能维持表达，细胞株中转染阳性率在90%以上；经蛋白免疫印迹法检测CASK表达明显降低；siCASK细胞株中G0/G1细胞比率下降，G2M期细胞比率明显上升，增殖指数明显提高，生长曲线左移。结论成功建立了CASK下调表达的ECV-304细胞株，CASK下调表达可导致细胞增殖能力增强。
%K RNA干扰
%K 钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶
%K 真核细胞转染
%K 细胞增殖
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200903171