%0 Journal Article
%T Smad3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
%A 王延洲
%A 梁志清
%A 刘晓芳
%A 徐惠成
%J 第三军医大学学报
%P 701-702
%D 2009
%X 目的构建Smad3基因RNAi慢病毒载体。方法针对已经筛选确定的Smad3基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切后的pGCSIL-GFP载体连接产生GC-shSmad3慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用GC-shSmad3、pHelper1.0载体和pHelper2.0载体共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果PCR和测序证实,构建出了Smad3shRNA的慢病毒载体GC-shSmad3。包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为3×108TU/ml。结论成功构建Smad3基因RNAi慢病毒载体。
%K RNA干扰
%K Smad
%K 慢病毒
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200902023