%0 Journal Article
%T 利用重叠PCR实现乙肝表面抗原CTL表位的替换
%A 王文敬
%A 黎诚耀
%A 李明松
%J 第三军医大学学报
%P 589-591
%D 2009
%X 目的以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3，GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD，构建用于预防和治疗乙肝的DNA疫苗。方法以重组表面抗原基因pcHBsAg质粒为模板，应用重叠延伸PCR扩增出含EYILSLEEL表位的HBsAg基因HBsAg/GPC3，将其插入pBSSK+载体中，构建出pBSSK/GPC3载体。利用DNA重组技术将其定向插入真核表达载体pcDNA3.1+中，将真核表达载体经PCR、酶切和测序鉴定，构建表达CTL表位EYILSLEEL的DNA疫苗。结果酶切和测序的结果显示序列无错配，获得了完整表达EYILSLEEL表位的真核质粒pcDNA3-HBsAg/GPC3。结论成功将EYILSLEEL表位替换HBsAg的内源性CTL表位，构建了pcDNA3-HBsAg/GPC3真核表达质粒。
%K 表位替换
%K 磷酸酰肌醇蛋白聚糖？蛋白
%K 细胞毒T淋巴细胞表位
%K 重叠延伸PCR
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200901073