%0 Journal Article
%T 脂多糖结合蛋白/CD14结合位点的初步定位
%A 徐智
%A 李琦
%A 冯起甲
%A 钱桂生
%A 徐顺贵
%A 李昆霖
%A 王兴胜
%A 吴国明
%J 第三军医大学学报
%P 565-568
%D 2009
%X 目的应用噬菌体随机12肽库、DNAStar分析软件、亲和实验及竞争抑制实验初步定位脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharidebindingprotein,LBP)与CD14的结合位点。方法以CD14为筛选分子，联合应用噬菌体肽库展示技术、噬菌体ELISA鉴定、LBP竞争抑制实验及DNA测序推导LBP/CD14结合位点的展示肽序列，采用DNAStar分析软件比对所获展示肽序列与LBP一级结构，初步定位LBP/CD14结合位点并人工合成其模拟肽。采用ELISA检测该模拟肽与CD14的亲和力及与LBP的竞争抑制活性。结果DNAStar比对结果表明，经噬菌体肽库筛选获得的8条展示肽氨基酸序列与LBP第252~263位氨基酸有一定相似性。LBP第252~263位氨基酸具有结合位点的特性，即有良好的亲水性、可及性、可塑性及抗原性，该部位可能是LBP/CD14的结合位点。体外活性实验表明，模拟肽FHRNHRSPVTLL可与CD14有良好的亲和力，有较强的与LBP竞争结合CD14的活性。结论LBP第252~263位氨基酸的模拟肽FHRNHRSPVTLL与CD14有良好的亲和力及有较强的与LBP竞争结合CD14的活性，具有LBP/CD14结合位点的生物学特性，LBP/CD14结合位点初步定位在该区域。
%K 脂多糖结合蛋白
%K CD
%K 噬菌体肽库
%K 模拟肽
%K 内毒素
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200809004