%0 Journal Article %T 新基因HA117最佳siRNA的筛选及重组腺病毒构建 %A 郑改焕 %A 金先庆 %A 罗庆 %A 郭玉霞 %A 宿玉玺 %A 徐酉华 %J 第三军医大学学报 %P 641-643 %D 2009 %X 目的验证pSOS-HUS筛选目的基因最佳siRNA的效果,应用pSOS-HUS筛选新基因HA117最佳siRNA,构建携带HA117基因最佳siRNA转录模板DNA的重组腺病毒。方法构建携带HA117基因及其siRNA模板DNA链的双克隆质粒。把双克隆质粒分别转染293细胞,通过镜下观察、流式细胞仪检测比较绿色荧光表达强度,RT-PCR检测HA117基因mRNA表达,筛选鉴定基因HA117最佳siRNA。构建HA117基因RNA干扰重组腺病毒。结果从5对模板DNA链中筛选出最有效片段HAi5,构建携带HAi5的重组腺病毒。结论载体pSOS-HUS可快捷有效地筛选目的基因的最佳siRNA;在5对模板DNA中,HAi5转录的siRNA对新基因HA117干扰效果最强;成功构建携带HAi5的重组腺病毒。 %K HA基因 %K pSOS-HUS %K RNA干扰 %K 多药耐药 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200807007