%0 Journal Article %T 肝内胆管上皮细胞上皮-间叶转化的实验研究 %A 赵礼金 %A 杨日高 %A 程龙 %A 王麦建 %A 江艳 %A 余德刚 %A 周廷梅 %A 王曙光 %J 第三军医大学学报 %P 214-219 %D 2010 %X 目的观察人肝内胆管上皮细胞(humanintrahepaticbiliaryepithelialcells,HIBEpiC)上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymaltransitions,EMT)现象,探讨EMT在胆管周围纤维化中的作用及其可能的分子机制。方法HIBEpiC用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理48、72h后,用PCR及Westernblot技术检测E-cadherin、S100A4和α-SMA的表达,以及与EMT信号通路相关的TGF-β1的表达;同时用紫杉醇、siRNAsmad2/3阻断TGF-β1的作用,探讨TGF-β1/smad2/3信号通路在HIBEpiC发生EMT时的可能作用。结果HIBEpiC经LPS处理后,TGF-β1mRNA表达于48h达到高峰,72h后开始下降,但维持较高水平(P<0.01,P<0.05);EMT标志物E-cadherinmRNA和蛋白表达随培养时间的延长逐渐降低(P<0.01),而S100A4、α-SMAmRNA及蛋白表达明显上调(P<0.01,P<0.05)。紫杉醇可使HIBEpiC中LPS所诱导的TGF-β1、Smad2/Smad3mRNA表达明显下降,特别是在48h最明显(P<0.01)。用siRNA技术可使Smad2/3mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.01),同时可使与HIBEpiC共培养EMT标志物E-cadherinmRNA及蛋白质表达上调(P<0.01,P<0.05),S100A4和α-SMA表达明显下调(P<0.01)。结论LPS可诱导HIBEpiC中TGF-β1的表达,使胆管上皮细胞发生EMT,抑制TGF-β1或Smad2/3,可使EMT发生逆转,提示TGF-β1或Smad2/3可能成为预防胆道周围纤维化的一个潜在靶点。 %K 肝内胆管 %K 上皮细胞 %K 表型 %K 脂多糖类 %K Smad蛋白类 %K 转化生长因子-β %K 紫杉醇 %K RNA %K 小分子干扰 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200909199