%0 Journal Article %T 基于ERC-PCR的环境内分泌干扰物检测体系研究 %A 谭文婷 %A 罗霄 %A 晏泽辉 %A 但芸婕 %A 毛青 %A 邓国宏 %J 第三军医大学学报 %P 1-4 %D 2010 %X 目的利用雌激素与雌激素受体α(estrogenreceptorα,ERα)间基于配体受体激活效应的生物学原理和探针的定量PCR扩增-实时荧光检测技术,建立痕量环境内分泌干扰物(endocrinedisruptingcompounds,EDCs)的快速检测体系。方法以2条含雌激素反应元件(estrogenresponseelements,ERE)并与ERα有高亲和力的DNA序列COX7RP-ERE和VitA2-ERE,作为结合探针,进行ERα体外受体?配体特异结合,形成配体-ERα-DNA探针复合体(ERα-DNAprobecomplex,ERC),荧光定量检测ERE含量,并考察17β?雌二醇(E2)、雌酮(E1)、己烯雌酚(DES)及邻苯二甲酸二甲酯(DMP)的结合情况。结果与VitA2-ERE相比,人源性COX7RP-ERE在ERα体外受体-配体结合过程中具有更好的结合效应;E1、E2、DES、DMP4种雌激素类化合物对COX7RP-ERE的结合存在明显的剂量-效应关系,其对COX7RP-ERE结合效应的半数有效浓度(EC50)分别为0.89nmol/L、19.9pmol/L、0.79nmol/L、6.31pmol/L。结论检测体系中结合探针的结合量存在明显的雌激素剂量依赖性,这种基于ERα激活效应的ERC?PCR定量检测体系可以用于监测化合物和EDCs的类雌激素活性。 %K 内分泌干扰物 %K 雌激素受体 %K 雌激素反应元件 %K 荧光定量PCR %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200910163