%0 Journal Article
%T RPS14基因重组慢病毒载体的构建及其在MUTZ-8细胞中的表达
%A 罗静
%A 蒋文
%A 刘林
%A 王利
%J 第三军医大学学报
%P 2252-2255
%D 2011
%X 目的构建携带人RPS14基因重组慢病毒载体获得稳定产毒的细胞，并观察其在人MDS细胞株MUTZ-8细胞中的表达。方法通过反转录方法，获得目的基因RPS14；将目的基因克隆入慢病毒表达质粒pGC-FUVector，构建含有RPS14基因的重组慢病毒载体pGC-FURPS14，经PCR、酶切及测序鉴定其正确性；在Lipofectamine2000介导下，将成功构建的质粒pGC-FURPS14与慢病毒包装质粒pHelper1.0、pHelper2.0共转染293T细胞，通过实时定量PCR法测定病毒滴度，并将获得的重组慢病毒载体pGC-FURPS14转染人MDS细胞株MUTZ-8，用流式细胞仪检测转染效率，RT-PCR检测靶细胞内RPS14mRNA的表达。结果含有RPS14基因的重组慢病毒载体经PCR、酶切和测序鉴定构建正确,且测定的病毒滴度为2.0×109TU/ml。流式细胞仪检测其转染效率为68.41%，RT-PCR检测到转染后RPS14mRNA在靶细胞中的稳定表达。结论构建了携带人RPS14基因的慢病毒载体，转染人MUTZ-8细胞株后能够稳定表达RPS14基因。
%K RPS基因
%K 慢病毒载体
%K 骨髓增生异常综合征
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201106076