%0 Journal Article
%T 肺炎链球菌表面蛋白A多价DNA疫苗交叉免疫保护作用评价
%A 张巧
%A 林科雄
%A 姚伟
%A 李琦
%A 钱桂生
%A 王长征
%A 马千里
%J 第三军医大学学报
%P 2230-2234
%D 2011
%X 目的评价肺炎链球菌表面蛋白A（PspA）优势家族亚类抗原的肺炎链球菌多价DNA疫苗抵御不同肺炎链球菌来源的异种PspA分子毒力作用的能力。方法以包含PspA抗原Fam1的Clade1亚类和Fam2的Clade3亚类DNA序列的T载体为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增具有高保护性抗体效价和强交叉反应的PspA优势家族亚类PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3片段，克隆至真核载体pcDNA3.1(+)，构建重组质粒pcDNA3.1-Clade1和pcDNA3.1-Clade3，免疫印迹（Westernblot）及逆转录聚合酶连反应（RT-PCR）检测重组质粒在哺乳动物细胞BHK-21中的表达。重组肺炎链球菌PspA多价DNA疫苗（pcDNA3.1-Clade1+pcDNA3.1-Clade3）肌肉注射免疫小鼠，观察免疫小鼠鼻咽部PspA异家族来源的不同肺炎链球菌携带情况改变和腹腔攻击小鼠21d的生存情况。结果成功构建肺炎链球菌PspA优势家族亚类抗原的肺炎链球菌多价DNA疫苗。疫苗（pcDNA3.1-Clade1+pcDNA3.1-Clade3）免疫组小鼠鼻咽部携带的PspA异家族来源的不同肺炎链球菌菌落计数无显著性差异（P>0.05），而明显少于空白质粒及PBS对照组小鼠（P<0.01）；疫苗（pcDNA3.1-Clade1+pcDNA3.1-Clade3）免疫组小鼠针对PspA异家族来源的不同肺炎链球菌腹腔攻击后中位生存时间无显著差异（P>0.05），而明显长于空白质粒及PBS对照组小鼠（P<0.01）。结论PspA优势家族亚类PspA-Fam1-Clade1和PspA-Fam2-Clade3的靶抗原组合形式能够有效解决PspA的抗原多样性问题，所构建的肺炎链球菌DNA疫苗有望针对PspA异家族来源的临床肺炎链球菌株感染。
%K 肺炎链球菌
%K 肺炎链球菌表面蛋白A
%K 核酸疫苗
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201107052