%0 Journal Article
%T 猪APOBEC3F基因克隆及真核表达载体的构建与鉴定
%A 孙宇
%A 罗佳
%A 马玉媛
%A 章金刚
%J 第三军医大学学报
%P 1904-1906
%D 2011
%X 目的克隆猪载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F（apolipoproteinBmRNAeditingenzyme，catalyticpolypeptide3F，APOBEC3F）基因，构建真核表达载体实现其在体外表达与鉴定。方法分离4头21周龄，体质量25~30kg的雌性健康五指山猪的外周血单个核细胞，Trizol法提取细胞总RNA，RT-PCR特异性扩增目的基因，目的基因插入真核表达载体pDsRed1-N1及改造的pCDNA3-Flage载体构建表达质粒并在PK-15细胞中进行表达。激光共聚焦显微镜及Westernblot鉴定目的基因的表达。结果克隆的目的基因与公布的基因序列同源性达99%；激光共聚焦显微镜显示目的基因在PK-15细胞表达，且表达产物定位于细胞质内；Westernblot检测示表达的目的蛋白大小与预期相符。结论成功构建了猪APOBEC3F真核表达载体。
%K APOBECF
%K 克隆
%K 真核表达载体
%K 鉴定
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201104161