%0 Journal Article
%T 人eIF4A3真核表达载体构建及稳定表达细胞株筛选
%A 李向云
%A 徐祥
%A 李秉煦
%A 黄宏
%A 徐云升
%J 第三军医大学学报
%P 1897-1899
%D 2011
%X 目的构建人eIF4A3重组质粒载体,筛选高表达人eIF4A3的稳定细胞株。方法RT-PCR克隆eIF4A3基因，将获得的基因片段分别连接到含有HA和c-myc标签的质粒载体上，转染HeLa细胞，经G418筛选获稳定表达细胞株，在体外翻译体系中进行体外翻译，通过免疫印迹鉴定eIF4A3的表达。结果成功构建人eIF4A3的真核表达载体，可在HeLa细胞中稳定表达，且能在体外翻译体系中翻译eIF4A3蛋白质。功能研究初步证明eIF4A3可以抑制荧光素酶报告基因的表达。结论获得了可稳定高表达人eIF4A3的HeLa细胞株及可用于体外翻译的真核表达载体。
%K 真核起始因子A
%K 稳定细胞株
%K 体外翻译
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201103059