%0 Journal Article %T 人eIF4A3真核表达载体构建及稳定表达细胞株筛选 %A 李向云 %A 徐祥 %A 李秉煦 %A 黄宏 %A 徐云升 %J 第三军医大学学报 %P 1897-1899 %D 2011 %X 目的构建人eIF4A3重组质粒载体,筛选高表达人eIF4A3的稳定细胞株。方法RT-PCR克隆eIF4A3基因,将获得的基因片段分别连接到含有HA和c-myc标签的质粒载体上,转染HeLa细胞,经G418筛选获稳定表达细胞株,在体外翻译体系中进行体外翻译,通过免疫印迹鉴定eIF4A3的表达。结果成功构建人eIF4A3的真核表达载体,可在HeLa细胞中稳定表达,且能在体外翻译体系中翻译eIF4A3蛋白质。功能研究初步证明eIF4A3可以抑制荧光素酶报告基因的表达。结论获得了可稳定高表达人eIF4A3的HeLa细胞株及可用于体外翻译的真核表达载体。 %K 真核起始因子A %K 稳定细胞株 %K 体外翻译 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201103059