%0 Journal Article
%T 结构特异性核酸酶FEN1对HBV复制的影响
%A 潘万龙
%A 方岩
%A 许舸
%A 单雪峰
%A 徐蕾
%A 陈可
%A 黄爱龙
%A 胡接力
%J 第三军医大学学报
%P 1925-1928
%D 2012
%X 目的探索宿主因子FEN1对HBV复制过程的影响。方法构建FEN1过表达慢病毒质粒，酶切鉴定并测序，转染293FT细胞，Westernblot检测FEN1蛋白表达。将该质粒转染HBV复制稳定细胞系，设立慢病毒包装改造质粒pLenti6/V5-D-TOPO和不转染质粒的细胞作为对照。ELISA检测细胞上清，Southernblot及Real-timePCR检测HBVDNA。结果初筛阳性克隆提取质粒酶切鉴定，于FEN1及线性载体质粒大小处出现明亮单一条带，测序结果表明序列插入正确，Westernblot检测FEN1蛋白表达量为对照的2～3倍。FEN1过表达质粒转染HBV复制稳定细胞株，细胞上清ELISA检测HBsAg抗原呈阳性，D（450）值为（1.982±0.032）；细胞内提取病毒DNA行Real-timePCR，绝对定量拷贝数为1.18×109，Southernblot检测亦表明HBV复制水平明显上调。结论结构特异性核酸酶FEN1能够明显促进HBVDNA复制，是体内一种重要的病毒复制调控因子。
%K DNA瓣核酸内切酶类
%K 慢病毒载体
%K 乙型肝炎病毒
%K 病毒复制
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201204032