%0 Journal Article
%T 应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸(FT3)化学发光法
%A 孔海霞
%A 刘萍
%A 田云霞
%A 宋启超
%A 王世鑫
%A 翁亚光
%J 第三军医大学学报
%P 201-205
%D 2012
%X 目的制备抗人T3多克隆抗体，应用异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanat，FITC）系统开发新型非均衡竞争技术，建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸（freetriiodothyronine，FT3）的方法。方法以T3牛血清白蛋白（bovinserumalbumin，BSA）为抗原免疫新西兰大白兔，制备抗人T3多克隆抗体，亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶（horseradishperoxidase,HRP）。用FITC标记T3类似物。采用抗FITC抗体包被发光板，FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原，通过非均衡竞争法原理，固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP，通过标准曲线计算FT3浓度，建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白（Bovineserumgammaglobulin,BGG）包被（非FITC系统）的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测，定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统（Elecsys2010）定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99，线性范围0.25~50pg/ml，分析灵敏度为0.25pg/ml，精密度测试批内、批间变异系数CV<5%，检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测，其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性，相关系数r=0.9622，两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强，以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强，有良好的准确性，达到临床测定的需求，可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。
%K 异硫氰酸荧光素
%K 非均衡竞争
%K 游离三碘甲腺原氨酸
%K 类似物
%K 多克隆抗体
%K 化学发光分析法
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201109213