%0 Journal Article %T 抗hMIF单克隆抗体的活性鉴定及其对脓毒症小鼠的保护作用 %A 张阳 %A 陈莎 %A 胡川闽 %A 李淑慧 %A 万瑛 %J 第三军医大学学报 %P 187-191 %D 2012 %X 目的对制备的人巨噬细胞移动抑制因子(anti-humanmacrophagemigrationinhibitoryfactor,hMIF)单克隆抗体进行生物学活性鉴定,并研究其对脓毒症小鼠的保护作用。方法通过ELISA、Westernblot、免疫组织化学等方法鉴定抗MIF单克隆抗体F11的亚类、抗体亲和力及特异性;通过一氧化氮(nitricoxide,NO)释放抑制试验和异构酶活性抑制试验,鉴定F11抗体的生物学活性;选用C57BL/6J小鼠构建CLP、LPS诱导脓毒症模型,研究F11抗体对脓毒症小鼠生存率的保护作用及对血清细胞因子TNF-α、IL-6的影响。结果F11抗体亚类为IgG1型,亲和力为2.5×1010,Westernblot及免疫组织化学显示强阳性;F11抗体显著抑制MIF刺激RAW264.7细胞释放NO(P<0.01)及MIF异构酶活性(P<0.01);明显提高脓毒症小鼠生存率(CLP模型:P<0.01,LPS模型:P<0.05)且具有剂量依赖关系,并对CLP术后血清TNF-α和IL-6的升高具有明显抑制作用(P<0.05)。结论成功制备了高特异性、高亲和力、具有异构酶活性抑制作用的抗MIF单克隆抗体,显著提高致脓毒症模型小鼠生存率并降低小鼠血清TNF-α、IL-6水平。 %K 巨噬细胞移动因子 %K 脓毒症 %K 单克隆抗体 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201109122