%0 Journal Article %T Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中的表达及抑制细胞增殖的研究 %A 肖正华 %A 高一萌 %A 彭慧娟 %A 张瑜 %A 罗淑娟 %A 令狐华 %J 第三军医大学学报 %P 1801-1804 %D 2013 %X 目的探讨卵巢浆液性癌组织中Rap1蛋白表达及其在浆液性癌细胞增殖中的作用。方法Westernblot检测并比较Rap1在浆液性卵巢癌组织、卵巢良性组织和正常卵巢组织中的表达;应用RNA干扰技术构建3个RaplshRNA真核表达载体,将3个重组质粒、空质粒、阴性质粒分别转染进卵巢癌细胞株SKOV3,通过Westernblot对重组质粒进行有效性筛选,G418筛选建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株;MTT法检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化。结果与卵巢良性组织和正常卵巢组织相比,浆液性卵巢癌组织中Rap1呈现高表达(P<0.05)。经双酶切和DNA测序证实成功构建了3个重组质粒pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#1,-Rap1i-#2及-Rap1i-#3;瞬时转染提示上述3个质粒的Rap1抑制效率分别是50%、66%、19%,遂最终采用pSUPER.retro.neo/GFP-Rap1i-#2转染并用G418筛选出单克隆细胞Rap1i-1和Rap1i-2,其Rap1蛋白抑制率分别为70%和48%,选取Rap1i-1细胞进一步检测Rap1表达缺失的SKOV3细胞增殖能力的变化,发现其增殖能力较对照组更强(P<0.05)。结论Rap1蛋白在卵巢浆液性癌组织中呈高表达并抑制细胞增殖。 %K 浆液性卵巢癌 %K Rap %K 肿瘤增殖 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201304100