%0 Journal Article
%T 人BNIP3基因真核表达载体的构建及其对HT-29细胞化疗敏感性的影响
%A 裴莉
%A 边志衡
%A 江恒
%A 陈克力
%A 陈建芳
%A 梁后杰
%J 第三军医大学学报
%P 1548-1551
%D 2013
%X 目的构建人BNIP3真核表达载体，观察BNIP3高表达对人结肠癌细胞HT-29化疗敏感性的影响。方法PCR法扩增BNIP3基因，酶切后插入质粒pEGFP-C3，构建重组真核表达载体pEGFP-C3/BNIP3。脂质体转染人结肠癌细胞HT-29，Westernblot检测BNIP3蛋白表达。MTT法检测5-氟尿嘧啶（5-Fu）的化疗敏感性和细胞增殖，AnnexinV-APC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果酶切电泳分析和DNA序列测定证实，重组质粒pEGFP-C3/BNIP3构建成功；转染重组质粒的HT-29细胞BNIP3蛋白明显高表达。与未转染组和转染空质粒pEGFP-C3组比较，转染pEGFP-C3/BNIP3组5-Fu的IC50值显著降低[(120.11±5.45)、(113.40±4.72)μg/mLvs(19.08±2.62)μg/mL，P<0.05]，细胞凋亡率显著增加[(5.51±0.32)%、(7.19±0.47)%vs(41.72±1.48)%，P<0.05]，细胞克隆形成显著减少[(52±6)、(49±5)vs(11±3)，P<0.05]，细胞增殖速度减慢。结论成功构建了人BNIP3真核表达载体，BNIP3高表达可增加HT-29细胞对5-Fu的化疗敏感性。
%K 结肠肿瘤
%K HT-细胞
%K BNIP基因
%K 化疗
%K 凋亡
%K 表达载体
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201304123