%0 Journal Article %T 人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响 %A 赵亮 %A 李静 %A 魏强 %A 游智梅 %A 夏菁 %A 李丹阳 %A 陈地龙 %J 第三军医大学学报 %P 20-24 %D 2013 %X 目的构建共表达绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucoseisomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响。方法RT-PCR、Westernblot检测人单核细胞、K562、KG1-α、HL-60细胞中PGImRNA和蛋白表达水平,筛选高表达PGI的白血病细胞系;构建人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照,经293T细胞包装后,获得可表达人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照;分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染白血病KG1-α细胞,筛选稳定转染细胞株。RT-PCR和Westernblot检测干扰组、阴性对照组及空白对照组KG1-α细胞PGI基因表达水平;CCK-8检测各组细胞增殖情况并作生长曲线。结果PGI基因在白血病KG1-a细胞中高表达;成功构建了稳定低表达PGI的白血病细胞株(KG1-α-siPGI);低表达PGI基因的KG1-α细胞增殖能力较空白对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了低表达PGI基因的白血病KG1-α细胞株,干扰PGI基因的表达能够抑制KG1-α细胞的生长。 %K 白血病 %K 慢病毒载体 %K RNA干扰 %K 细胞增殖 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201208080