%0 Journal Article %T 应用Lv-pNanog-GFP慢病毒载体探讨Nanog在调控结直肠癌细胞的自我更新与转移能力中的作用 %A 朱传琳 %A 姚超 %A 钱程 %A 徐先林 %A 欧刚卫 %J 第三军医大学学报 %P 29-32 %D 2014 %X 目的探讨干细胞标记物Nanog对结直肠癌细胞的自我更新以及转移能力的影响。方法将本实验室已构建的Nanog启动子携带绿色荧光蛋白的慢病毒载体Lv-pNanog-GFP感染人结直肠癌细胞系HCT116,并经流式分选得到GFP表达阳性和阴性的细胞,通过Westernblot检测病毒的有效性,克隆形成实验和成球实验检测肿瘤细胞的自我更新能力,Transwell实验检测肿瘤细胞的转移能力。结果细胞系在感染病毒12h后,倒置荧光显微镜下可观察到GFP的荧光表达,说明病毒Lv-pNanog-GFP可稳定感染人结直肠癌细胞HCT116,且GFP的阳性率为5.9%。Westernblot结果显示,根据GFP所分选出的细胞能准确的对应Nanog的表达量。Nanog阳性细胞的克隆形成率[(56.3±2.87)%]显著大于Nanog阴性细胞的克隆形成率[(19±2.16)%](P<0.05)。Nanog阳性细胞所形成的干细胞球体积明显增大且成球率[(34±4)%]显著大于Nanog阴性细胞[(10.67±6.43)%](P<0.05),说明Nanog阳性细胞具有更强的自我更新能力。Nanog阳性细胞穿过Transwell小室的细胞数(175.8±12.89)比Nanog阴性细胞(74.6±16.55)显著增多(P<0.05),说明Nanog阳性细胞具有更强的转移能力。结论在结直肠癌细胞中Nanog调控肿瘤细胞的自我更新以及转移能力。 %K 结直肠癌 %K Nanog %K 肿瘤干细胞 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201306074