%0 Journal Article
%T HIV-1Rev蛋白和人DDX3解旋酶对HCVRNA复制影响
%A 罗亚东
%A 洪国枯
%A 贾鸣
%A 郭艳
%A 刘明
%A 毛青
%J 第三军医大学学报
%P 2329-2333
%D 2015
%X 目的研究人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）病毒颗粒蛋白表达调节因子（regulatorofvirionproteinexpression,Rev）和DEAD-box蛋白家族ATP依赖的RNA解旋酶3（DDX3）对HCVRNA复制的影响。方法利用HCV表达质粒pCDNA3.1-JFH1转染Huh7细胞以构建稳定的HCV细胞复制模型，另构建pCDNA3.1-Rev-Flag-mCherry和pCDNA3.1-DDX3-YFP-Flag的过表达载体，通过PCR、Westernblot和核苷酸测序等方法鉴定载体构建成功后，将实验分为2组对照实验，对照组均只将HCV复制质粒转染Huh7细胞：1组实验组为DDX3和HCVRNA复制质粒共转染入Huh7细胞；2组的实验组为Rev、DDX3和HCVRNA复制质粒共转染入Huh7细胞。最后通过qPCR定量测定各组HCVRNA复制水平并进行比较。结果转染后48h测各组HCVRNA的复制水平，DDX3+HCVRNA复制质粒组中HCVRNA的水平（1.09×107±0.18×107）明显高于单独转染HCVRNA复制质粒组(4.79×106±1.24×106)（P=0.03）；而Rev+DDX3+HCVRNA复制质粒组中HCVRNA的水平(1.74×107±0.40×107)明显低于单独转染HCVRNA复制质粒组（4.17×107±0.46×107）（P<0.001）。结论成功构建Rev蛋白和DDX3的过表达载体，并初步证明人DDX3解旋酶可促进HCVRNA的复制，而Rev蛋白和DDX3共同作用可抑制HCVRNA的复制。
%K 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型
%K 病毒颗粒蛋白表达调节因子
%K DEAD-box蛋白家族的ATP依赖的RNA解旋酶
%K 丙型肝炎病毒
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201508080