%0 Journal Article
%T 异位表达FOXO4对胃癌细胞凋亡的影响
%A 赵亮
%A 高蕊
%A 刘菁
%A 黄慧哲
%J 第三军医大学学报
%P 1830-1836
%D 2015
%X 目的应用pCMV5-Flag和pLL3.7真核表达载体构建ForkheadboxO4(FOXO4)基因的过表达质粒和干扰RNA表达质粒，研究其对胃癌细胞凋亡的影响。方法将FOXO4基因的开放阅读框克隆入pCMV5-Flag载体，将靶向FOXO4基因的siRNA克隆入pLL3.7载体，获得FOXO4的表达质粒Flag-FOXO4和干扰质粒FOXO4-shRNA。将获得的质粒及对照质粒通过脂质体转染MKN45和SGC7901胃癌细胞，Westernblot检测其对细胞中FOXO4蛋白的表达和沉默效率。FCM检测其对细胞凋亡的影响，Westernblot检测CleavedCaspase-3的表达以及应用Real-timePCR检测其对促凋亡转录因子BCL-6的表达的变化。结果成功构建FOXO4的表达质粒Flag-FOXO4和干扰质粒FOXO4-shRNA。Westernblot结果表明，Flag-FOXO4可以明显增加细胞FOXO4的表达，FOXO4-shRNA明显抑制细胞FOXO4的表达。FCM结果显示，Flag-FOXO4组与Control组相比较，MKN45细胞和SGC7901细胞凋亡显著增加了16.54%（P<0.001）和26.23%（P<0.001）。Westernblot结果显示CleavedCaspase-3表达与FCM结果一致。Real-timePCR结果表明Flag-FOXO4组细胞FOXO4下游促凋亡基因BCL-6的表达显著增加（P<0.01），FOXO4-shRNA明显抑制了细胞BCL-6的表达（P<0.01）。结论FOXO4的过表达可能通过增加FOXO4下游促凋亡基因BCL-6的表达促进了胃癌细胞的凋亡。FOXO4的沉默降低了BCL-6的表达。
%K FOXO基因
%K 过表达
%K RNA干扰
%K 细胞凋亡
%K 胃癌细胞
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201412156