%0 Journal Article
%T Versican基因RNAi慢病毒载体的构建及其对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用
%A 封明霞
%A 伍津津
%A 杨桂红
%J 第三军医大学学报
%P 1460-1465
%D 2015
%X 目的构建Versican基因RNAi慢病毒载体并研究Versican对毛乳头细胞聚集性生长的干预作用。方法根据人Versican基因序列，构建4个携带RNAi序列的慢病毒载体，利用293T细胞进行慢病毒包装。实验分为Control组（不做处理）、NC组（用空慢病毒载体包装的病毒转染细胞）和KD1、KD2、KD3、KD4VersicanRNAi慢病毒感染组。应用KD1、KD2、KD3、KD4VersicanRNAi慢病毒及NC慢病毒感染H1299细胞，荧光显微镜下观察感染效率，应用Real-timePCR检测Versican的表达，筛选出感染效率和特异性最高的慢病毒载体进行下一步研究。用慢病毒感染毛乳头细胞后，用Real-timePCR检测Versican基因的表达，并用Westernblot检测Versican、ADAMTS4、p-c-JUN蛋白的表达，应用光镜观察毛乳头的生长情况。结果成功构建4种慢病毒载体，其中KD2慢病毒感染H1299细胞较其他慢病毒、Control和NC组显著下调VersicanmRNA的表达(P<0.01)。应用KD2慢病毒感染毛乳头细胞后，较Control和NC组明显下调毛乳头细胞VersicanmRNA和蛋白的表达(P<0.01)，ADAMTS4、p-c-JUN蛋白的表达较Control组明显下调(P<0.01)，毛乳头细胞聚集性生长的特性消失。结论成功构建了Versican基因RNAi慢病毒载体。Versican基因通过c-JUN-ADAMTS-4通路调控毛乳头细胞的聚集性生长。
%K 多功能蛋白聚糖类
%K RNA干扰
%K 慢病毒
%K 毛乳头细胞
%K 聚集性生长
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201410171