%0 Journal Article
%T 表达靶向癌胚抗原的嵌合受体的慢病毒载体构建及初步应用
%A 余晓玲
%A 杨智
%A 彭维
%A 钱程
%J 第三军医大学学报
%P 1096-1101
%D 2015
%X 目的构建表达靶向癌胚抗原（carcinoembryonicantigen，CEA）的嵌合抗原受体（chimericantigenreceptor，CAR）的慢病毒载体LV-EF1α-CEA-2A-GFP-WPRE,研究该载体感染T淋巴细胞后嵌合抗原受体的表达以及对CEA阳性肿瘤细胞系的杀伤作用。方法利用常规分子克隆技术从含靶向CEA的单链化抗体的载体上得到抗CEA抗体的编码序列，通过测序鉴定，采用酶切将基因片段插入慢病毒载体中。慢病毒载体感染T淋巴细胞后，通过非变性非还原Westernblot、流式细胞术检测CEA-CAR在T淋巴细胞中的表达，体外杀伤实验检测对CEA阳性肿瘤细胞系的杀伤效果。结果测序结果显示CEA-CAR的序列正确，酶切结果显示慢病毒载体LV-EF1α-CEA-2A-GFP-WPRE构建正确；感染T淋巴细胞后CEA-CAR阳性表达率为62.8%；可有效杀伤CEA阳性肿瘤细胞系（P<0.01）。结论成功构建了表达靶向CEA的嵌合抗原受体LV-EF1α-CEA-2A-GFP-WPRE的慢病毒载体，该嵌合抗原受体可在T细胞中正确表达，并有效杀伤CEA阳性肿瘤细胞。
%K 嵌合抗原受体
%K 肿瘤免疫治疗
%K CEA
%K 慢病毒
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201412238