%0 Journal Article
%T 5-碘代杀结核菌素对HT-29细胞DLC-1基因的去甲基化作用
%A 张灵敏
%A 王亚旭
%A 谢凯
%A 曾令海
%A 李权
%J 第三军医大学学报
%P 106-110
%D 2015
%X 目的探讨5-碘代杀结核菌素（5-iodotubercidin，ITU）对人结肠癌细胞HT-29株增殖凋亡及DLC-1基因表达的影响。方法不同浓度（0.1、0.5、1、2、4、6、8、10μmol/L）ITU作用于HT-29细胞48h，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测HT-29细胞的增殖活性；ITU（0、2、4、6μmol/L）作用于HT-29细胞48h，流式细胞仪检测其凋亡率；ITU（0、2、4、6μmol/L）作用于HT-29细胞48h，亚硫酸氢盐克隆测序法（BSP）检测DLC-1基因启动子区CpG岛甲基化情况；同上的处理细胞的方法，逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测肝癌缺失基因-1（deletedinlivercancer-1,DLC-1）mRNA的表达；Westernblot检测DLC-1基因蛋白表达。结果①ITU可明显抑制HT-29细胞活力，在一定范围内随着药物浓度增加抑制细胞活力的作用越强（P<0.05），以6μmol/L组对HT-29细胞影响最大，IC50=（5.92±0.62）μmol/L。②分别以0、2、4、6μmol/LITU作用于HT-29细胞后，流式细胞仪检测各组凋亡率，分别为（9.56±2.21）%、（22.18±3.16）%、（34.23±3.16）%、（40.50±3.16）%，表明随着ITU浓度增加，对HT-29细胞的促凋亡作用越强。③经0、2、4、6μmol/LITU处理后DLC-1基因启动子区CpG岛甲基化率分别为91.67%、75.00%、61.67%、43.33%，表明ITU可以引起DLC-1基因启动子区甲基化程度降低。④在HT-29细胞中可检测到少量DLC-1mRNA和蛋白的表达；相同条件经0、2、4、6μmol/LITU处理细胞后检测显示DLC-1基因mRNA和蛋白的表达增加，并随浓度增长，mRNA及蛋白表达随之增加。结论ITU可抑制人结肠癌HT-29细胞增殖，促进HT-29细胞凋亡，而这种抑制增殖作用可能和ITU降低DLC-1基因启动子区甲基化水平而诱导DLC-1基因上调有关。
%K -碘代杀结核菌素
%K 甲基化
%K 结直肠肿瘤
%K 基因
%K DLC-
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201408133