%0 Journal Article %T 一种大豆SNP分型新方法 %A 袁翠平 %A 李英慧 %A 刘章雄 %A 关荣霞 %A 常汝镇 %A 邱丽娟 %J 大豆科学 %D 2007 %R 10.3969/j.issn.1000-9841.2007.04.001 %X 单核苷酸多态性(SNP)在大豆基因组中分布广泛,SNP分型是大豆SNP遗传作图,关联分析、分子标记辅助选择等研究的重要技术。本文以Rhg4基因开发的5个SNP为例,介绍了一种大豆SNP分型的新方法-片段长度差异等位基因特异性PCR(FLDAS-PCR)。采用AS-PCR原理,针对某个SNP位点设计2条相差4-5bp的特异引物和1个公用引物,PCR产物约100bp或150bp,2种等位基因型PCR产物相差4-5bp,在2个特异引物3′端第3和4碱基位置分别人为引入错配碱基来提高PCR特异性,通过6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可将纯合和杂合基因型检测出来。探讨了特异引物浓度和退火温度对Rhg4-1592扩增效果的影响,研究表明,可通过调整特异引物浓度和退火温度优化扩增效果。FLDAS-PCR对18份种质分型结果与PCR产物克隆测序法一致,表明本研究建立的FLDAS-PCR法是一种简便、快捷、新型的大豆SNP分型方法。 %K 大豆 %K SNP %K 分型 %K 片段长度差异等位基因特异性PCR %U http://ddkx.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=200704001