%0 Journal Article
%T 菜豆几丁质酶基因的克隆、序列分析及其表达
%A 曲敏
%A 王全伟
%A 李新玲
%J 大豆科学
%P 121-126
%D 2007
%R 10.3969/j.issn.1000-9841.2007.02.001
%X 根据GenBank中收录的菜豆几丁质酶基因mRNA序列设计一对引物，以菜豆品种五常油豆总DNA为模板，通过PCR扩增获得一个约1.1kb的DNA片段Bchi，将其克隆入pUC18载体。测序和序列分析结果表明，该序列全长1088bp，含有一个981bp的完整开放读码框，无内含子，编码327个氨基酸，编码产物在结构上具有ClassIa几丁质酶的结构特征：N-端具有一个26个氨基酸的信号肽，其后是富含8个半胱氨酸、长41个氨基酸的几丁质结合区和由249个氨基酸组成的高度保守的催化区，C-端为由11个氨基酸组成的液泡定位多肽。序列与结构上的同源性分析表明Bchi基因是菜豆ClassIa几丁质酶基因。此序列已在GenBank中注册，登录号为AY357300。以pQE-30为原核表达载体，构建成pQE-Bchi重组表达载体，转化表达受体菌E.coliM15，经IPTG诱导后表达出一个约35kD的蛋白，与推测的Bchi基因编码产物的大小一致，表明Bchi基因在大肠杆菌中能够表达，是一个具有表达功能的基因。
%K 菜豆
%K 几丁质酶基因
%K 克隆
%K 序列分析
%K 表达
%U http://ddkx.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=200702001