%0 Journal Article %T 逆转录环介导等温扩增技术快速检测大豆花叶病毒 %A 张雯娜 %A 李晋玉 %A 田金艳 %A 卫其巍 %A 智海剑 %A 陶小荣 %J 大豆科学 %P 422-428 %D 2014 %R 10.11861/j.issn.1000?9841.2014.03.0422 %X 大豆花叶病毒(Soybeanmosaicvirus,SMV)是一种在世界很多国家广泛分布并极具破坏性的植物病毒,导致大豆严重减产和种质衰退,每年都会给很多国家带来巨大的农业经济损失,为此,建立了一种逆转录环介导等温扩增(Reversetranscriptionloopmediatedisothermalamplification,RTLAMP)全新的SMV检测技术,利用该技术可以快速、准确与有效地检测大豆植株和种子中携带的SMV。根据GenBank数据库中大豆花叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计并筛选到了SMVRT-LAMP特异性引物组,应用该引物组优化了RT-LAMP反应参数,灵敏度实验结果表明,RT-LAMP检测SMV比普通RT-PCR灵敏度高10~100倍。结合RNA粗提法,建立了一步法RT-LAMP快速、灵敏地检测到植物叶片中的SMV。加入荧光染料SYBRGreenI则可在反应管中直接观察检测结果,实现了检测的可视化。该RT-LAMP技术还可灵敏地检测到大豆种子中携带的SMV。RT-LAMP检测方法第一次应用于SMV的检测,具有灵敏度高、速度快和特异性强的优点,可应用于实验室和田间大豆样品SMV的快速检测。 %K 大豆花叶病毒 %K 快速检测 %K RT-LAMP %K 大豆 %K 种子带毒检测 %U http://ddkx.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201403023