%0 Journal Article %T 大豆GmSOT1基因克隆、载体构建及初步表达研究 %A 谢璐遥 %A 李晓琳 %A 罗利 %A 文涛 %A 朱木兰 %J 大豆科学 %P 815-819 %D 2014 %R 10.11861/j.issn.1000-9841.2014.06.0815 %X 磺酸基转移酶(sulphotransferase,简称SOT)是硫代葡萄糖苷(glucosinolate,简称硫苷)核心结构合成途径中的关键酶之一。本研究采用反向遗传学方法从大豆基因组中克隆GmSOT1基因并对其功能进行初步研究。首先采用PCR方法扩增大豆-GmSOT1-基因,并将其连接到pRNAi载体上的35S(CaMV35S)启动子后面;将35S:GmSOT1-基因片段从pRNAi载体上双酶切下来,连接到植物双元表达载体pCAMBIA2301的多克隆位点上,且命名为pCAMBIA2301-35S:GmSOT1;采用根癌农杆菌介导的遗传转化方法转化大豆成熟胚,并考察其初步表达结果。结果表明:大豆-GmSOT1-基因的编码区(codingsequences,简称CDS)由1014bp的核苷酸组成,编码一个长度为337个氨基酸残基的蛋白质;35S:GmSOT1被成功导入大豆胚细胞,初步观察发现GmSOT1过量表达导致大豆胚根明显膨大弯曲。 %K 大豆 %K 磺酸基转移酶 %K 硫代葡萄糖苷 %K 基因克隆 %K 载体构建 %U http://ddkx.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201406004