%0 Journal Article
%T 天然氮末端重组cC可溶性分泌表达
%A 张慧丽
%A 杨松
%A 何金萍
%A 胡冰洁
%A 曲方
%A 宋有涛
%J 中国公共卫生
%P 485-487
%D 2008
%R 10.11847/zgggws2008-24-04-59
%X ？目的构建具有天然氮末端的重组鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂(chickencystatin,cC)在毕赤酵母中高效分泌表达。方法通过设计独特的引物,利用DNA重组技术将cC的cDNA片段插入分泌型酵母表达载体pPICZαA中,构建相应的重组酵母表达质粒pPICZαA-cC,并在巴氏毕赤酵母(Pichiapastoris)菌株X-33中甲醇诱导表达。结果经十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、底物活性SDS-PAGE和Native-PAGE分析,随着不同剂量的β-巯基乙醇和盐酸胍组合处理重组cC,二硫键被破坏的程度加深,5mol/L盐酸胍与10%β-巯基乙醇的组合几乎完全打开了分子内的二硫键。结论92.9%的重组cC具有二硫键并与天然cC具有相似的木瓜蛋白酶抑制活性。
%K 重组鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cC)
%K 天然氮末端
%K 毕赤酵母
%K 类淀粉样特性
%K 二硫键
%U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract13174.shtml