%0 Journal Article %T 亚洲牛带绦虫TaCRISP基因克隆、表达和序列分析 %A 戴鹏 %A 戴佳琳 %A 黄江 %A 廖兴江 %A 郎书源 %A 周灵贵 %A 申萍香 %J 中国公共卫生 %P 398-400 %D 2009 %R 10.11847/zgggws2009-25-04-07 %X ?目的通过筛选亚洲牛带绦虫(Taeniasaginataasiatica)成虫cDNA质粒文库,识别半胱氨酸分泌蛋白(TaCRISP),并进行克隆表达,为进一步研究其功能提供基础依据。方法用生物信息学方法从亚洲牛带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别TaCRISP的全长编码基因并预测编码蛋白质的各种结构与功能;将其编码区序列克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,测序鉴定重组质粒,之后进行诱导表达,表达产物经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。结果该基因全长1090bp,编码239个氨基酸,1aa-16aa位为分泌信号肽,理论分子量为26973.8,等电点为5.96。生物信息分析揭示,TaCRISP与中殖孔绦虫CRISP一致性为38%,相似性为54%;所构建的重组体经PCR、双酶切及测序鉴定与目标基因相符。SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希菌BL-21/DE3中表达成功。结论发现亚洲牛带绦虫TaCRISP基因,成功构建重组原核表达质粒并表达出融合蛋白。 %K 亚洲牛带绦虫 %K 半胱氨酸分泌蛋白 %K 分子克隆 %K 原核表达 %K 序列分析 %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract12296.shtml