%0 Journal Article %T A型肉毒梭菌atx基因TaqMan探针荧光定量PCR检测 %A 王春晖 %A 赵素慧 %A 韦耀 %A 周莹 %A 万成松 %J 中国公共卫生 %P 863-865 %D 2012 %R 10.11847/zgggws-2012-28-06-59 %X ?目的采用TaqMan探针荧光定量PCR方法对A型肉毒梭菌atx基因进行检测。方法以atx基因为靶基因,设计引物和TaqMan探针,优化反应条件,制作定量标准曲线,进行灵敏度、特异性和重复性验证,建立A型肉毒梭菌TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果构建质粒pUC57-△atx,标准曲线在103~103拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.997,灵敏度达到22个拷贝数,比普通PCR提高约100倍;能选择性检测A型肉毒梭菌,与其他5种食源性病原菌无交叉反应,结果与普通PCR一致;重复性试验表明,同一浓度的15个平行样品的变异系数为1.0%。结论A型肉毒梭菌TaqMan探针荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可以快速、准确、定量地检测A型肉毒梭菌。 %K 肉毒梭菌 %K TaqMan探针 %K atx基因 %K 荧光定量PCR %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract9165.shtml