%0 Journal Article
%T 羊布鲁菌OMP31蛋白基因表达及抗原性分析
%A 吴静波
%A 丘金浪
%A 逯光文
%A 许翔
%A 邱菲
%A 黎诚耀
%A 王文敬
%J 中国公共卫生
%P 596-598
%D 2013
%R 10.11847/zgggws2013-29-04-48
%X ？目的构建布鲁菌OMP31蛋白原核表达载体,获得OMP31蛋白。方法PCR扩增OMP31基因,连接入pET-30a(+)表达载体中,构建pET-30a(+)/OMP31质粒,双酶切鉴定、测序正确后,转化入大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以不同浓度的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,并通过二十烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析;蛋白质免疫印迹(westernblot)初步分析其免疫原性。结果成功构建pET-30a(+)/OMP31表达载体,并表达出OMP31蛋白,分子量约为31kDa,主要以包涵体形式存在;通过复性获得>95%的高纯度可溶性蛋白;以布鲁菌虎红平板阳性血清检测,显示复性后蛋白具有良好的免疫反应性。结论成功表达出带组氨酸(HIS)标签的OMP31融合蛋白,且具有较好的蛋白抗原性。
%K 布鲁菌
%K OMP31
%K 表达载体构建
%K 蛋白表达
%K 抗原性
%U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract8505.shtml