%0 Journal Article %T 家蝇抗真菌肽MAF-1原核表达条件优化及活性验证 %A 彭传林 %A 魏川川 %A 吴建伟 %A 王宇 %A 修江帆 %A 罗振华 %J 中国公共卫生 %P 1420-1423 %D 2015 %R 10.11847/zgggws2015-31-11-16 %X ?目的优化家蝇抗真菌肽(MAF-1)原核表达条件及重组蛋白的活性验证。方法利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和QuantityOne凝胶电泳图像分析系统研究不同的诱导温度、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度和诱导时间对融合蛋白表达的影响;融合蛋白用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行蛋白纯化,切除His标签后进行活性验证。结果在加入浓度为25μmol/L的IPTG,34℃诱导18h,融合蛋白的表达量最高;融合蛋白纯化后浓度为0.706mg/mL,其最低抑杀白色念珠菌的浓度为70μg/mL。结论成功获得重组融合蛋白的最佳表达条件,并纯化目的蛋白,切除His标签后的目的蛋白具有抗真菌活性。 %K 家蝇抗真菌肽(MAF-1) %K 重组融合蛋白 %K 表达条件 %K 纯化 %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract29087.shtml