%0 Journal Article %T 河南猪流感病毒H3N2分离株NP基因表达及抗原性分析 %A 赵朴 %A 苏红辽 %A 刘兴友 %A 赵坤 %A 胡建和 %A 王三虎 %A 姚四新 %A 郑玉姝 %J 中国公共卫生 %P 1173-1175 %D 2015 %R 10.11847/zgggws2015-31-09-19 %X ?目的表达猪流感病毒(swineinfluenzavirus,SIV)H3N2分离株NP基因,获得具有良好抗原性的NP蛋白。方法PCR扩增猪流感病毒A/swine/Henan/2/2008(H3N2)NP基因,经EcoRI和XhoI双酶切后插入pET32a(+)载体,并转化大肠杆菌Rosset(DE3)菌株;PCR、EcoRI和XhoI双酶切及DNA测序鉴定重组质粒pET32a-NP;IPTG诱导,表达、纯化NP并免疫家兔制备免疫血清,SDS-PAGE、WB测其反应原性;同时构建pcDNA3.1-NP并转染293T细胞,免疫荧光检测其免疫源性。结果成功构建重组载体pET32a-NP和pcDNA3.1-NP,SDS-PAGE和WB显示融合蛋白约80kD,能与感染SIV的猪血清特异性反应,并且纯化蛋白制备的多克隆血清能识别293T细胞中表达的NP蛋白。结论正确表达SIVH3N2NP蛋白,并有良好的抗原性,为研究猪流感病毒NP诊断抗原和亚单位疫苗奠定基础。 %K 猪流感病毒 %K NP基因 %K 表达 %K 抗原性 %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract29097.shtml