%0 Journal Article %T 对虾白斑综合症病毒IE1基因表达与鉴定 %A 高溳 %A 金春英 %A 王蔚 %J 中国公共卫生 %P 535-536 %D 2011 %R 10.11847/zgggws-2011-27-05-04 %X ?目的探讨对虾白斑综合症病毒极早期基因IE1原核表达载体的构建与表达。方法将IE1编码序列克隆入pGEX-4T-2原核表达载体,并转染大肠埃希菌BL21,异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导谷胱甘肽硫转移酶(GST-IE1)融合蛋白表达,亲和层析法纯化,并用聚丙烯酰胺变性凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(westernblot)对融合蛋白进行鉴定。结果克隆到IE1基因序列长675bp,编码224个氨基酸,理论分子量为25kDa,等电点为4.87,所构建的重组体经PCR、双酶切及测序鉴定与目标基因相符,SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠埃希氏菌BL21中表达成功。结论克隆构建了对虾白斑综合症病毒极早期基因IE1,并在原核细胞中获得表达。 %K 白斑综合症病毒 %K IE1基因 %K 极早期蛋白 %U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract10394.shtml