%0 Journal Article
%T 神经突起因子酵母双杂交诱饵质粒构建和转化
%A 罗星
%A 张峪涵
%A 于娜
%A 孔雪
%A 徐坚
%A 顾少华
%A 杨磊
%A 黄瑾
%J 中国公共卫生
%P 444-445
%D 2006
%R 10.11847/zgggws2006-22-04-41
%X ？目的构建和转化神经突起因子(Neuritin)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究Neuritin的功能及作用机制奠定基础。方法用PCR扩增neuritin全长cDNA中编码开放读框的基因片段;将该基因片段与pLex-A载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入EGY48[p8op-LacZ]酵母菌株。结果成功构建pLexA-neuritin重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的2种EGY48[p8op-LacZ]酵母都能在SD/Gal/Raf/-His/-Ura培养基中长成白色菌落,同时,转化pLexA-pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落,但都不能在SD/-His/-Leu/-Ura培养基中生长,在SD/-His/-Ura液中培养16h后,A600均值均为0.9。表明重组质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,也没有酵母毒性作用。结论构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选。
%K 神经突起因子
%K 酵母双杂交
%K 诱饵质粒
%U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract14812.shtml