%0 Journal Article
%T 小鼠Cdc25B融合蛋白构建和表达
%A 赵鸿梅
%A 滕秋艳
%A 张哲
%A 于秉治
%J 中国公共卫生
%P 976-977
%D 2007
%R 10.11847/zgggws2007-23-08-42
%X ？目的研究小鼠N末端缺失286氨基酸的野生型Cdc25B原核表达载体的构建和表达.方法应用Primer5.0软件分析并设计小鼠Cdc25B5′及3′端引物(N末端缺失286氨基酶),化学合成并用聚合酶链反就(PCR)方法扩增,经限制性内切酶酶切后连接原核表达载体PGEX4T-2,构建成PGEX4T-2-Cdc25B融合表达载体,转化大肠埃希菌BL21后,通过异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导进行目的蛋白表达.结果通过双酶切、电泳分析及测序证明成功构建了Cdc25B融合表达载体,融合蛋白产物经蛋白印迹(Westernblot)显示,相对分子量为53KD的蛋白谱带,与预期一致.结论成功构建并表达了Cdc25B-N末端缺失的基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为近一步研究Cdc25B的功能提供基础依据.
%K Cdc25B
%K 基因表达
%K 谷胱甘肽转移酶(GST)
%K 聚合酶链式反应
%U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract13727.shtml